Mikä on densitometria Western blot?

Sisällysluettelo:

Mikä on densitometria Western blot?
Mikä on densitometria Western blot?
Anonim

Western blot -menetelmiä varten luotuja densitometriatietoja käytetään yleensä proteiinien runsauden vertaamiseen näytteiden välillä. … Epälineaarisia densitometriatietoja havaittiin, kun Western blot -analyysit havaittiin infrapunafluoresenssilla tai kemiluminesenssilla ja erilaisissa SDS-PAGE-olosuhteissa.

Mikä on densitometria-analyysi?

Tiheysmittaus on optisen tiheyden kvantitatiivinen mittaus valoherkissä materiaaleissa, kuten valokuvapaperissa tai valokuvafilmissä, valolle altistumisen vuoksi.

Kuinka käytät densitometriaa kuvassa J?

Tiheysmittaus ImageJ

  1. Napsauta neliön keskustaa ja vedä se seuraavalle kaistalle. …
  2. Toista toimenpide viimeisen kaistan kohdalla, mutta paina Ctrl ja 3 asettaaksesi viimeinen kaista. …
  3. Käytä viivatyökalua viivojen piirtämiseen poistaaksesi kaistan taustan laskelmista. …
  4. Hae raportti siirtymällä kohtaan: Analyse→Gels→ Label Peaks.

Miten analysoit Western blot -tuloksia?

Validoi kvantitointityökalusi . Suorita esimerkiksi blot, jossa kaistat on ladattu 20 µg, 15 µg ja 10 µg kokonaisproteiinia. Analyysin jälkeen kohdealueiden suhteellisen kvantifioinnin tulee olla 2, 1,5 ja 1. Kokeile erilaisia kvantitointityökaluja ja asetuksia, kunnes voit luotettavasti toistaa oikeat tulokset.

Kuinka määrität Western blotin?

Vaihe 1: Määritä tausta-vähennyskiinnostavan proteiinin tiheydet (PI) ja normalisoiva kontrolli (NC). Vaihe 2: Tunnista NC, jolla on suurin tiheysarvo. Vaihe 3: Jaa kaikki NC-arvot suurimmalla NC-tiheyden arvolla saadaksesi suhteellinen NC-arvo.

Suositeltava: