Kontrollivasta-aineiden lataaminen ovat tärkeitä kontrolleja, koska ne osoittavat näytteiden tasaisen lataamisen kaikissa kuopissa. Latauskontrollit osoittavat myös proteiinien oikeanlaisen siirtymisen kalvoon Western blot -prosessin aikana. Latauskontrollit ovat tyypillisesti proteiineja, joilla on korkea ja kaikkialla esiintyvä ekspressio.
Mitä lataussäädin tekee?
Lataamiskontrolli on proteiini, jota käytetään kontrollina Western blot -kokeissa. … Niitä käytetään varmistamaan, että proteiinia on ladattu tasaisesti kaikkiin kuoppiin.
Miksi käytämme latausohjausta Western blotissa?
Lataussäätimillä on toinen rooli ohjaajana Western blotissa. Niitä voidaan käyttää tarkistamaan, että geeli on siirtynyt tasaisesti kalvoon koko geelin läpi. Tämä on välttämätöntä, kun verrataan proteiinien ilmentymistasoja näytteiden välillä.
Kuinka käytät latausohjausta Western blotissa?
Latausohjaimien signaaleja käytetään tyypillisesti kiinnostavien proteiinien signaalien normalisointiin. Lataamiskontrollin käyttämiseksi näihin tarkoituksiin havaitseminen kontrolliproteiinivasta-aineella ja kokeellisella vasta-aineella tulee tehdä samalla blotilla. Latauskontrollina käytetään useita erilaisia proteiineja.
Miksi aktiinia käytetään lataussäätimenä?
Beta-aktiini, käytetään yleensä Western Blotin latauskontrollinanormalisoi havaitut proteiinitasot vahvistamalla, että proteiinikuormitus on sama geelissä.
