Restriktiohajotustuote voidaan helposti varastoida -20 C:ssa. 4 C:ssa se olisi hyvä, mutta jotta varmistetaan, ettei aktiivisuutta ja tähtiaktiivisuutta ole suositeltavaa säilyttää -20 C.
Kuinka säilytät pilkottua DNA:ta?
Kokeile säilyttämällä geeliviipaletta jääkaapissa yön yli tai jopa sulattamalla siivu puskurissa ja pakastamalla -20°C tai -80°C. DNA:n hajoaminen tapahtuu samalla nopeudella ja samoissa olosuhteissa kuin liukoinen DNA, joten käytä kylmempää lämpötilaa pidempään varastointiin.
Mitä tarkoittaa, että plasmidi pilkkoutuu?
Puhdastettu plasmidi-DNA pilkotaan yhdellä tai useammalla restriktioentsyymillä (RE:llä), jotka on valittu antamaan selkeä DNA-vyöhykekuvio, joka erotetaan helposti elektroforeesilla. … Yleensä valitaan restriktioentsyymejä, jotka leikkaavat usean kloonauskohdan (MCS) sisällä ja johtavat 2–5 helposti erotettavan vyöhykkeen diagnostiseen malliin.
Kuinka säilytät linearisoituja plasmideja?
Jos olet huolissasi TE:n myötävirtaan vaikuttavista vaikutuksista, säilytä DNA suuremmassa pitoisuudessa ja laimenna tarvittaessa tai käytä "matalaa TE:tä", joka on 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. kun DNA tai RNA on puhdas, sitä voidaan säilyttää -20 C:ssa useita kuukausia ilman hajoamista.
Kuinka kauan voit pitää rajoitustiivistelmän?
Pro-Tip Sovelluksesta ja reaktiossa olevan DNA:n määrästä riippuen inkubointiaika voi vaihdella 45 minuutista yön yli. Diagnostisia tiivistelmiä varten 1-2 tuntia onusein riittävä. >1 µg:lla kloonaukseen käytettyä DNA:ta sisältävää pilkkomista suositellaan suorittamaan vähintään 4 tuntia.
