Inkuboi suonia huoneenlämmössä 2-3 minuuttia . Lujasti kiinnittyneet solut voidaan irrottaa nopeasti 37 °C:ssa. Tarkkaile soluja mikroskoopilla. Irronneet solut näyttävät pyöristetyiltä ja taittuvilta mikroskoopilla katsottuna.
Mitä tapahtuu, jos trypsinoit soluja liian kauan?
Solujen inkubointi liian korkealla trypsiinipitoisuudella liian pitkään vaurioittaa solukalvoja ja tappaa solut. Jos olet epävarma käytettävästä trypsiinin pitoisuudesta, käytä alhaista pitoisuutta.
Kuinka trypsinoit solut?
Solut voidaan suspendoida uudelleen pipetoimalla solususpensiota varovasti möykkyjen hajottamiseksi. Tarvittaessa voidaan laimentaa lisää solujen laskemista ja/tai jatkoviljelyä varten.
Kuinka kauan kestää, että solut kiinnittyvät?
ensimmäiset solut kiinnittyvät jo 3-5 min jälkeen! Kokemukseni mukaan useimmat EC:t kiinnitettiin 10-20 minuutin kuluttua. Mutta mitä kauemmin odotat, sitä tiukempi kiinnitys on.
Onko haitallista trypsinoida soluja kahtena päivänä peräkkäin?
Kyllä, se on haitallista, jos trypsinoit solujasi jatkuvasti 24 tunnin halkaisun jälkeen. Halkaisu on suositeltavaa tehdä 48 tunnin halkaisun jälkeen. … Voit ylläpitää soluja, kunnes morfologia on hyvä (Se riippuu solutyypistäsi, jotkut solut voivat mennä jopa 80 siirrostukseen ja jotkut jopa 10).
