Kyllä todellakin, jos kloroformia ei ole poistettu kunnolla faagivalmisteesta. Kloroformia lisätään tavallisesti faagin eristys-/puhdistusvaiheeseen bakteerien poistamiseksi. … Kloroformi ei ole välttämätön vaihe, ja on otettava huomioon, että se voi inaktivoida muita bakteereissa olevia faageja.
Mitä kloroformi tekee E colille?
Kloroformi tässä yhteydessä tappaa bakteerit nopeasti. Voit todistaa titraamalla CFU:ta ennen ja jälkeen ravistelun CHCl3:lla. Uuden faagin saaminen indusoiduista bakteereista kestää jonkin aikaa (piilevä ajanjakso induktiosta) eikä todennäköisesti nopeasti tapetuista bakteereista.
Mikä on kloroformin rooli bakteriofagin eristämisessä?
Koli-faageilla kloroformikäsittelyä käytetään yleensä tappamaan läsnä olevat bakteerit, ja suodatinsterilointivaihe jätetään joskuspois. Kloroformi saattaa inaktivoida joitain faageja, ja sitä tulee käyttää varoen ja asianmukaisin kontrolloin. Natriumatsidia voidaan käyttää myös joihinkin faageihin.
Mitä kloroformia käytetään lysaatin valmistukseen faagieristyksen aikana?
Kloroformia lisätään 15-20 minuutiksi solujen hajottamiseksi vapauttaen viruspartikkelit alustaan.
Miten eristät bakteriofagit?
Bakteriofagien eristäminen faagihoitoa varten esitetään usein melko suoraviivaisena harjoituksena, jossa faagipitoinen näyte sekoitetaan isäntäbakteerien kanssa, jota seuraa yksinkertainen bakteerijätteen poistaminensuodattamalla ja/tai sentrifugoimalla seuraavana päivänä [1, 2, 3].
