Kuitenkin kun emissiospektrit menevät päällekkäin, useamman kuin yhden fluorokromin fluoresenssi voidaan havaita. Tämän spektrin päällekkäisyyden korjaamiseksi käytetään fluoresenssin kompensointiprosessia. Tämä varmistaa, että tietyssä detektorissa havaittu fluoresenssi on peräisin mitatusta fluorokromista.
Miksi tarvitsemme kompensaatiota virtaussytometriassa?
Kompensointi vaaditaan virtaussytometriakokeeseen fluoresenssin fysiikan takia. Fluorokromi virittyy ja lähettää fotonin eri aallonpituuksilla. Jotkut näistä fotoneista roiskuvat toiseen ilmaisimeen, jolloin yksittäiset värjätyt näytteet näyttävät kaksoispositiivisilta.
Mikä on kompensoivan solun käytön päätarkoitus?
Ensisijainen tarkoitus on mahdollistaa todellisen fluoresenssin mittaaminen ensisijaisessa kanavassa, joka on kontaminoitunut viereisten fluoroforien leviämisestä. Siksi kompensaatio korjaa fluoroforien välisen fluoresenssin "lukituksen". Se ei kuitenkaan ole täydellinen, eikä se voi korjata kaikkia ei-toivottuja vaikutuksia.
Mikä on kompensaatiomatriisi?
Korjausmatriisi lasketaan käyttämällä yksivärisiä fluoresoivan ohjaustiedoston tiedostoja, jotka on kerätty ImageStreamiin tai FlowSightiin, kun kaikki kanavat on kerätty ja jos kirkaskenttävaloa tai SSC:tä ei ole.
Mikä on spektrikompensaatio?
Käyttäen spektriäkompensointi tarkoittaa, että ei-ensisijaisten ilmaisimien signaalia käytetään edelleen parantamaan merkkien todellista signaalia mahdollisuuksien mukaan. Ensisijaisia kontrollinäytteitä käytetään parametrien nimeämiseen. … Ensisijaisissa ilmaisimissa käytetyt näytteet auttavat myös nimeämään nämä parametrit spektrikompensoinnin jälkeen.