Kaksiulotteinen geelielektroforeesi eli 2D-PAGE on proteomiikan ensisijainen tekniikka. Se erottaa monimutkaisen näyteseoksen käyttämällä proteiinien kahta erilaista ominaisuutta. Ensimmäisessä ulottuvuudessa proteiinit erotetaan pI-arvolla ja toisessa dimensiossa suhteellisella molekyylipainolla.
Mikä on kaksiulotteisen elektroforeesin periaate?
Käytetty periaate oli hyvin yksinkertainen: proteiinit erotettiin geelillä käyttämällä isoelektristä fokusointia (IEF), joka erottaa proteiinit ensimmäisessä ulottuvuudessa niiden isoelektrisen pisteen mukaan, mitä seurasi elektroforeesi toisessa ulottuvuudessa natriumdodekyylisulfaatin (SDS) läsnä ollessa, joka erottaa proteiinit …
Milloin kaksiulotteinen geelielektroforeesi oli käytössä?
Proteiiniseokset erotetaan kahdella ominaisuudella kahdessa ulottuvuudessa 2D-geeleissä. O'Farrell ja Klose esittelivät 2-DE:n itsenäisesti vuonna 1975.
Mikä on 2D-geelielektroforeesin tarkoitus?
Esittely. Kaksiulotteista polyakryyliamidigeelielektroforeesia (2-DE) pidetään tehokkaana työkaluna, jota käytetään monimutkaisten proteiiniseosten erottamiseen ja fraktiointiin kudoksista, soluista tai muista biologisista näytteistä. Se mahdollistaa satojen tai tuhansien proteiinien erottamisen yhdessä geelissä.
Mitä ovat kaksiulotteisen 2D-geelielektroforeesin 2 vaihetta ja millä perusteella proteiinit ovaterotettu jokaisessa?
2-DE erottaa proteiinit kahdesta eri vaiheesta riippuen: ensimmäistä kutsutaan isoelektriseksi fokusoinniksi (IEF), joka erottaa proteiinit isoelektristen pisteiden mukaan (pI); toinen vaihe on SDS-polyakryyliamidigeelielektroforeesi (SDS-PAGE), joka erottaa proteiinit molekyylipainojen perusteella (suhteellinen molekyyli…