Kuinka trypsiini inaktivoidaan?

Sisällysluettelo:

Kuinka trypsiini inaktivoidaan?
Kuinka trypsiini inaktivoidaan?
Anonim

Kun solut näyttävät irronneen, lisää 2 tilavuutta esilämmitettyä täydellistä kasvualustaa trypsiinin inaktivoimiseksi. Levitä väliaine varovasti pipeteillä solukerroksen pinnalle useita kertoja varmistaaksesi, että >95 % soluista saadaan t alteen.

Kuinka lopetan trypsiinitoiminnan?

Trypsiinin pilkkominen voidaan pysäyttää jäädyttämällä tai alentamalla reaktion pH alle pH 4:n lisäämällä muurahais-, etikka- tai trifluorietikkahappoa (trypsiini aktivoituu uudelleen, kun pH nostetaan yli pH 4). Digestoidut näytteet voidaan säilyttää -20°C:ssa.

Mikä neutraloi trypsiinin?

Puskuri kalsium- ja magnesiumioneja sisältävä hidastaa myös trypsiinin toimintaa. FBS on kuitenkin tehokkaampi tapa estää trypsiiniaktiivisuutta.

Inaktivoiko seerumi trypsiiniä?

Seerumi inaktivoi munuaisten entsymaattisesta pilkkomisesta jäljelle jääneen trypsiinin ja solujen myöhemmin syntetisoimat proteolyyttiset entsyymit. Juuri trypsinoidut solut voitiin kasvattaa yksikerroksiksi ilman seerumia edellyttäen, että ne pestään toistuvasti trypsiinijäämien poistamiseksi.

Kuinka paljon materiaalia tarvitaan trypsiinin poistamiseen käytöstä?

Niin kauan kuin käytät vähintään 1:1 suhteessa 5-10 % seerumia sisältävää väliainetta trypsiinin kanssa, eston pitäisi olla enemmän kuin riittävä ja sen jälkeen sentrifugoitu ja väliaineen vaihto tuoreeseen väliaineeseen.

Suositeltava:

Mielenkiintoisia artikkeleita
Omistaako Jay Blades korjaamon?
Lue lisää

Omistaako Jay Blades korjaamon?

Jay Blades on säännöllinen suosikki BBC-ohjelmassa The Repair Shop, sillä hän on esiintynyt sarjassa sen alusta lähtien vuonna 2017. Tv-työnsä lisäksi 50-vuotias on myös the Jay & Co:n perustaja, sosiaalinen yritys, joka auttaa heikommassa asemassa olevia ja syrjäytyneitä ryhmiä.

Pitäisikö minun käyttää esikäännettyjä otsikoita?
Lue lisää

Pitäisikö minun käyttää esikäännettyjä otsikoita?

Oikein käytettynä esikäännetty otsikko voi säästää arvokasta käännösaikaa. Mutta huonosti käytettyinä esikäännetyt otsikot voivat piilottaa lähdekoodissasi ongelmia, joita et ehkä huomaa ennen kuin yrität käyttää osia siitä uudelleen toisessa projektissa.

Pitäisikö minun pakata rintapumppu sairaalakassiin?
Lue lisää

Pitäisikö minun pakata rintapumppu sairaalakassiin?

Pakkaa kaksi vauvan asua – yksi valokuvausta varten ja toinen kotiin käytettäväksi, sillä ensimmäinen saattaa likaantua. Monet sairaalat eivät tarjoa sukkia ja lapasia vastasyntyneille, joten muista pakata nekin mukaan varmuuden vuoksi. … Tyypillisesti naisten ei tarvitse tuoda rintapumppuaan sairaalaan.