Lusiferiini on yleinen bioluminesoiva reportteri, jota käytetään lusiferaasin ilmentymisen in vitro -kuvaukseen. Tämä Firefly-lusiferaasientsyymin vesiliukoinen substraatti (tyypillisesti Photinus pyralis -bakteerista) käyttää ATP:tä ja Mg2+:aa yhteistekijöinä tyypillisen keltavihreän päästön muodostamiseksi hapen läsnä ollessa.
Mitä D-Luciferin tekee?
Luciferin on yleinen bioluminesoiva reportteri, jota käytetään lusiferaasin ilmentymisen in vivo -kuvaukseen . Tämä tulikärpäsen lusiferaasientsyymin vesiliukoinen substraatti käyttää ATP:tä ja Mg2+ kofaktoreina, jotka muodostavat tyypillisen keltavihreän emission hapen läsnä ollessa., joka muuttuu punaiseksi valoksi in vivo 37°C:ssa.
Mikä on D-Luciferin kalium?
Tiedot. D-lusiferiinin kaliumsuola on hyödyllinen substraatti Firefly Luciferase -entsyymille. Lusiferaasientsyymin hapettuessa tuottaa bioluminesenssia. D-lusiferiiniä voidaan käyttää kiinnostavaan promoottoriin kytketyn lusiferaasigeenin ilmentymisen määrittämiseen.
Kuinka teet D-Luciferiniä?
1. Valmista 200X lusiferiinin kantaliuos (30 mg/ml) steriiliin veteen. Sekoita varovasti kääntämällä, kunnes lusiferiini on täysin liuennut. Käytä välittömästi tai jaa eriin ja pakasta -20°C myöhempää käyttöä varten.
Kuinka pistät lusiferiinin?
(Lusiferiiniä annetaan tavallisesti joko vatsaontelonsisäisesti tai suonensisäisesti.) Esimerkki: Injektoi 10 µlLusiferiinin varastoliuos per gramma ruumiinpainoa (normaalisti ~200 µl 20 g:n hiirelle tavanomaiselle 150 mg/kg injektiolle). 5. Odota 10–20 minuuttia ennen kuvantamista, jotta saat maksimaalisen lusiferaasisignaalin tasannen.
