Aiempina vuosina Coriell käytti kaikkea lämmöllä inaktivoitua seerumia soluviljelmiinsä inaktivoidakseen vastasyntyneen vasikan seerumissa olevan komplementtiproteiinin. Koska olemme siirtyneet naudan sikiön seerumiin, havaitsemme, että lämpöinaktivointi on ei välttämätöntä useimmille solulinjoille.
Kuinka kauan lämmität FBS:n pois päältä?
Seuraavaa protokollaa suositellaan naudan sikiön seerumin (FBS) lämpöinaktivointiin. FBS kuumennetaan 56 ± 2 °C:seen 30±2 minuutiksi sekoittavassa vesihauteessa. Lämpöinaktivointi (HI) – prosessi, jolla FBS:ää pidetään 56±2°:n lämpötilassa 30±2 minuuttia.
Miksi lämpöinaktivointi on tarpeen FBS:lle ennen käyttöä?
Yleinen FBS:n hoito on lämpöinaktivointi, jossa FBS:ää kuumennetaan 56 °C:ssa 30 minuuttia vesihauteessa ajoittain ravistellen. Tarkoituksena on inaktivoida kaikki FBS:ssä olevat komplementtijärjestelmän komponentit [24] ja muut mahdolliset tuntemattomat solukasvun estäjät.
Miksi sinun täytyy lämpöinaktivoida seerumi?
Lämmön inaktivoinnin tavoitteena on hävittää komplementin aktiivisuus seerumissa vaikuttamatta tuotteen kasvua edistäviin ominaisuuksiin. Komplementin aktiivisuuden poistaminen seerumista ei ole tarpeen useimmissa soluviljelmissä, mutta se voi olla tarpeen viljelmissä, jotka ovat herkkiä komplementin aktiivisuudelle.
Kuinka varastoit lämpöinaktivoitua FBS:ää?
Suojaa sulanut FBS ja muut seerumit turvallisella jäähdytyksellä javarastointi. Käytä sulatettua seerumia välittömästi. Nestemäinen FBS ja muut seerumit voidaan säilyttää jääkaapissa (2-8 °C) jopa neljä viikkoa.
